（一）样本类型的选择与 DNA 提取原理
常规样本的特性对比
血液 / 血痕：DNA 浓度最高（每毫升含数百万个细胞），提取成功率近 100%，适合司法鉴定（可追溯来源）。需用 EDTA 抗凝管保存，常温下可稳定 72 小时。
口腔拭子：采集无创（适合儿童），但含菌量高，需采集 3-5 根拭子（每根擦拭口腔内侧 15 秒），自然晾干后保存（潮湿环境易霉变）。
带毛囊毛发：需拔取 5 根以上（自然脱落的无毛囊），毛囊中含核 DNA，毛发杆仅含线粒体 DNA（无法用于常染色体鉴定）。
特殊样本的处理难点
指甲 / 烟蒂：DNA 含量极低（仅数十至数百个细胞），需特殊提取试剂，成功率约 70%。指甲需剪取靠近甲床的部分（含活细胞），烟蒂需去除烟丝残留（避免烟草成分干扰）。
骨骼 / 牙齿：需先脱钙处理，提取周期长达 10 个工作日，常用于已故人员的亲缘鉴定。古代骨骼因 DNA 降解，可能仅能检测线粒体片段（母系遗传）。
胎儿样本：羊水含胎儿脱落细胞（需孕 16 周后采集），绒毛膜样本（孕 11-13 周）DNA 更完整，但有 0.5% 流产风险；无创静脉血（孕 6 周 +）含胎儿游离 DNA（占比 10%-20%），需通过高通量测序分离。
（二）样本保存与运输的关键细节
短期保存的环境要求
常温（15-25℃）：血液样本可保存 24 小时，口腔拭子、毛发可保存 7 天。
冷藏（2-8℃）：血液样本可延长至 72 小时，特殊样本（如指甲）可保存 1 个月。
冷冻（-20℃）：适合长期保存（半年以上），但反复冻融会导致 DNA 断裂，需单独封装避免交叉污染。
运输过程的防护措施
样本需用密封袋双层包装，标注 “生物样本” 标识。夏季运输需加冰袋（避免超过 30℃），冬季需防冻结（血液结冰会破坏细胞）。邮寄时选择顺丰等特快物流，附采样说明（样本类型、采集时间、对应人）。
样本失效的常见原因
污染：采集时接触皮肤油脂、唾液或其他生物样本（如多人样本混放）。
降解：潮湿环境滋生细菌，或阳光直射导致 DNA 链断裂。
量不足：特殊样本（如烟蒂）使用时间过短（少于 5 分钟），细胞残留太少。
（三）实验室检测的核心技术环节
DNA 提取与纯化
采用磁珠法或酚氯仿法分离 DNA，去除蛋白质、糖类等杂质。合格的 DNA 样本需满足：浓度≥50ng/μL，纯度（OD260/OD280）在 1.8-2.0 之间（低于 1.6 可能含蛋白质污染，高于 2.0 可能含 RNA）。
PCR 扩增的精准控制
通过聚合酶链式反应放大特定 STR 位点（如 D2S1338、D19S433 等），需严格控制温度循环（变性 95℃、退火 55-60℃、延伸 72℃）。扩增失败可能因样本降解或引物设计不当，需重新提取样本。
电泳分离与基因分型
扩增产物经毛细管电泳分离，根据片段大小确定等位基因分型。仪器分辨率需达到 1bp，确保区分相近长度的片段。最终通过计算亲权指数（PI）判断关系：累计 PI≥10000 支持亲子关系，3 个以上位点不匹配则排除。