（一）常见样本的特性与采集规范
血液样本：黄金标准的采集要点
静脉血需用 EDTA 抗凝管（紫色帽）采集 2-3ml，采集后轻轻颠倒 5 次避免凝固，4℃冷藏可保存 72 小时。
指尖血需用无菌采血针取 3-5 滴，滴在专用血卡的圆圈区域（直径≥1cm），自然晾干 2 小时（避免阳光直射），装入透气纸袋。
禁忌：近期（3 个月内）接受过输血或骨髓移植者不宜用血液样本，需选择口腔拭子等其他样本。
口腔拭子：无创采集的关键技巧
采集前 30 分钟禁食、漱口，用无菌棉签（单头）在口腔内侧颊黏膜处旋转擦拭 15-20 次（力度以黏膜微充血为宜），每侧采集 3 根，共 6 根。
采集后将棉签放在干净纸巾上自然晾干（约 1 小时），避免相互接触，装入标有姓名的信封。
优势：适合婴幼儿、老年人及晕血者，DNA 提取成功率达 99%，与血液样本准确率一致。
毛发样本：最易出错的采集方式
必须拔取带完整毛囊（根部白色物质）的毛发 5-8 根，剪取的毛发无毛囊不可用，自然脱落的毛发毛囊易退化也不建议使用。
拔取后避免用手触碰毛囊，放在干净纸上晾干 10 分钟，装入纸质信封（禁用塑料袋，防止霉变）。
注意：染发、烫发不影响检测结果，但白发因色素减少可能需增加样本量。
特殊样本：处理难度与成功率
烟头：需收集被鉴定人连续吸食的 3-5 个，去除烟丝残留，用镊子夹取放入信封（避免手触烟蒂部分），成功率约 85%。
指甲：需剪取近甲床的部分（至少 5 片），用肥皂洗净晾干，成功率约 70%（甲板 DNA 含量低）。
牙刷：需使用 1 个月以上的牙刷，清水冲洗残留牙膏后晾干，成功率约 90%（需避免多人共用）。
（二）样本保存与运输的科学方法
短期保存条件
常温（15-25℃）：口腔拭子、毛发可保存 7 天，血液样本（血卡）可保存 30 天。
冷藏（2-8℃）：血液（液态）可延长至 72 小时，特殊样本（如指甲、烟头）可保存 15 天。
冷冻（-20℃）：适合长期保存（半年以上），但需单独密封避免与其他样本交叉污染。
运输过程的防护措施
包装：样本用自封袋密封后放入泡沫箱，特殊样本需标注 “生物样本”“易碎” 标识。
温度控制：夏季加冰袋（避免样本直接接触冰袋），冬季用保温棉防止冻结（血液样本冻结会破坏细胞）。
物流选择：优先顺丰特快，附采样清单（样本类型、采集时间、对应人信息），避免平邮导致延误。
样本失效的常见原因
污染：采集时接触皮肤油脂、唾液或其他生物样本（如多人样本混放）。
降解：潮湿环境滋生细菌（如南方梅雨季节需加干燥剂），或阳光直射导致 DNA 链断裂。
量不足：特殊样本（如烟蒂）使用时间过短（少于 5 分钟），细胞残留太少。
（三）实验室检测的核心流程
DNA 提取：从样本到纯净 DNA
采用磁珠法提取：通过磁性微粒吸附 DNA，去除蛋白质、糖类等杂质，提取后的 DNA 需检测浓度（≥50ng/μL）和纯度（OD260/OD280=1.8-2.0）。
难点：特殊样本（如骨骼）需先脱钙处理，古代样本（如牙齿）需去除腐殖质，提取时间延长至 24 小时。
PCR 扩增：放大关键基因片段
针对 21 个 STR 位点（如 D3S1358、vWA、FGA 等）进行扩增，通过温度循环（95℃变性、58℃退火、72℃延伸）实现 DNA 片段复制。
质量控制：每批次实验设置阳性对照（已知 DNA 样本）和阴性对照（无 DNA 样本），确保扩增体系无污染。
基因分型与结果判定
扩增产物经毛细管电泳分离，根据片段大小确定等位基因分型，通过专业软件计算亲权指数（PI）。
判定标准：累计亲权指数≥10000（即亲权概率≥99.99%）支持亲子关系；3 个以上位点不匹配则排除亲子关系；1-2 个位点不匹配需增加检测位点（排除基因突变可能）。